中国CAR-T细胞疗法的商业化进程:病毒载体的大规模纯化丨医麦猛爆料

中国CAR-T细胞疗法的商业化进程:病毒载体的大规模纯化

 

本文转自:翌圣生物 医麦客

原文链接:https://mp.weixin.qq.com/s/91GWauMF9hyaOSC_1g9W1g

 

自从 2017年FDA先后批准了两款CAR-T细胞治疗产品:诺华Kymriah与吉利德的Yescarta,此后,国内及全球细胞治疗市场迅猛发展,中国企业集体爆发,注册临床个数很快达到全球领先水平,并在2021年6月份正式迎来首个产品的上市(复兴凯特的奕凯达)

 

 

机遇与挑战并存

 

 

快速发展的同时也带来了新的挑战,细胞治疗产品的异质性引入了制造复杂性和新的监管问题,以及传统药物制造中不存在的放大复杂性问题。CAR-T作为一种个性化治疗方式,成本过高也限制了从实验室到商业化的转变

 

 

载体供应成为大规模生产中的关键挑战

 

 

由于没有成熟的工艺及质量研究平台,载体供应可能是现阶段细胞和基因治疗领域中最大限制因素之一,由于所使用的病毒载体具有高度多样性和复杂性,大量制造非常耗时,需数年才能构建相关的专业知识体系,对于新手来说并不容易。

 

 

慢病毒载体仍然是最广泛的转染方式

 

 

CAR基因的转导方法有慢病毒、γ-逆转录病毒、转座子及mRNA电穿孔等方式。

 

慢病毒载体具有极高的转导效率(接近100%)、很高的基因负荷量(8 kb)以及更小的基因毒性,相比于其他病毒更加安全,并且有研究表明慢病毒转染的CAR-T显示出更显著的抗肿瘤效率,是目前基因转导最主流的方法之一。

 

 

病毒载体是自体CAR-T成本最大组成部分

 

 

病毒载体的整个生产过程需要满足GMP级别要求,还需要进行额外的放行检测,加上昂贵的转染试剂和质粒,使得病毒的生产成本较高,占到了CAR-T总生产成本的30%左右(数据来源:兴业证券)。

 

 

CAR-T产品商业化生产新模式

 

 

CAR-T产品的生产需要建立3个GMP车间:质粒、病毒、T细胞。从生产团队建设、产品生产到运营等都需要巨大的资金输入。

 

基于整个CAR-T产品产业化所面临的问题,国内逐渐出现大量质粒到病毒的一站式平台服务的CDMO公司,可以使CAR-T企业将更多的精力集中在药物研发和临床试验上。

 

 

全能核酸酶助力CAR-T产业高效纯化慢病毒

 

 

翌圣生物自主研发的超洁净分子酶UCF.ME® UltraNuclease全能核酸酶能够在多种应用场景切割和降解各种形式的DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸协助CAR-T以及CDMO企业高效纯化慢病毒,解决宿主DNA残留带来的潜在安全性问题。

 

1、酶的比活≥1.5×10U/mg(通用底物绝对定量法)

 

酶活*在37℃,pH 8.0反应条件,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)

 

2、酶的纯度≥99%HPLC

 

 

3、不同反应条件对酶活的影响(部分数据)

 

 

4、储存及冻融稳定性(持续更新)

 

 

5质检标准符合GMP生产要求

 

注:具体的质检标准及数据请参考批次COA

 

 

全能核酸酶检测ELISA kitUltraNuclease Elisa kit

 

 

在正常的病毒纯化步骤中,全能核酸酶作为杂质很容易被去除。为了检测全能核酸酶的残留,翌圣研发了配套的UltraNuclease ELISA kit能够准确检测样本中全能核酸酶的残留量,该试剂盒在线性、重复性、回收率及特异性等方面均表现优异

 

1、检测范围:0.047~3 ng/mLR20.99

 

 

2、批次间重复性好:CV15%

 

 

3、模拟样本回收率:70%-130%CV15%

 

 

4、特异性强:在多种样本中测试均未见干扰

 

 

 

产品信息

 

 


 

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